无精症、少精症患者中AZF缺失的检测

在1976年，Tiepolo等人首次报道了在Y染色体长臂（Yqll）的常染色质部分存在一个与精子生成紧密相关的基因组AZFCS。Kent-First等人进一步将该区域划分为四个非重叠的功能亚区：AZFa、AZFb、AZFc和AZFd。这些亚区的估计长度各异，其中AZFc又可细分为近端、中部和远端三个子区域。迄今为止，全球范围内已对约6000名患者的AZF区域进行了检测，发现微小缺失的比例在3%-30%之间。

AZF区域的大片段缺失主要出现在AZFa区域，这种情况在唯支持细胞综合征或重度少精症患者中尤为常见，占比约为7%。而对于AZF的微小缺失，则可能在唯支持细胞综合征和重度少精症患者中均出现。特别是AZF6或AZFc的缺失，可能表现为轻度少精症或畸精症。

采用多重PCR技术可以有效检测Y染色体的微小缺失。在此研究中，我们未检测到AZFa和AZFb区域的缺失，只发现了AZFb区域的缺失，这与Simoni等人的实验结果相吻合。Simoni等人对168例非阻塞性、特发性无精症和重度少精症患者的DAZ基因进行了分析，证实了DAZ是AZF的重要候选基因。关于DAZ基因的缺失发生率，各项研究报道存在较大的差异，介于1.9%到18%之间。

在我们的研究中，检测到的两个AZFc亚区缺失位点sY254和sY255均位于DAZ基因内，缺失率为3.6%。这一相对较低的缺失率可能是由于筛选患者的标准不同。某些研究采用睾丸活检来选择患者，排除那些在精液中难以找到或找不到精子的无精症或少精症患者，因为他们可能属于阻塞性无精症。尽管睾丸活检对于DAZ和AZF的分子遗传学研究非常有价值，但由于其对于男性不育就诊者来说难以接受，因此难以广泛采用这种筛选方法。

值得注意的是，DAZ基因仅在睾丸组织中表达，这表明DAZ基因只参与男性特有的生理过程，进一步支持了DAZ基因对精子生成过程的重要性的假设。在我们的研究中，检测到的AZFc缺失患者均为无精症。有些报道显示少精症患者也存在AZF缺失。这提示我们，可能还有其他因素如遗传背景、输精管微环境等与DAZ基因共同影响精子的生成。

关于sY254位点的研究，该位点包含一个外显子和一个内含子，其PCR扩增产物为400bp。PCR-SSCP结果显示，在48例无精症、少精症患者中，没有出现点突变。这初步表明sY254位点的点突变可能与无精症或少精症的关系不大，但仍需进一步的研究来确认。受到样本基因组DNA耗尽的限制，我们无法对所有患者进行sY254点突变检测。sY254与无精症或少精症之间的关系仍有待进一步探讨。

对于男性不育问题，尤其是与精子生成相关的研究，仍在不断深入。对于AZF、DAZ以及其它相关基因的研究，将有助于我们更好地理解男性生育机制的复杂性，从而为未来的生育医学提供新的方向和可能性。