如何解决细胞培养中的支原体污染

支原体：细胞培养中的隐形杀手

一说起支原体，细胞培养人员恐怕会手心冒汗。支原体，这种在细胞培养中悄然无声、杀细胞于无形的生物，如同潜伏在暗处的刺客，让人防不胜防。尽管急性污染容易察觉，但支原体的慢性般的存在却往往让人难以察觉。据统计，超过25%的细胞系已感染支原体，而大多数研究者却浑然不觉。

支原体的起源可能早期源于血清，随后通过实验室仪器、培养基等逐渐传播。它们生长缓慢，却能以多种方式改变细胞的新陈代谢，影响蛋白表达等实验结果。传统抗生素对支原体无效，因为它们没有细胞壁，这也是支原体感染率居高不下的原因。一位细胞培养专家曾戏言：“我对支原体的了解，并不是因为喜欢，而是因为大部分细胞系都受到了它们的侵袭。”

那么，如何对抗这隐形的敌人呢？对培养物进行常规的支原体检测至关重要。检测频率因实验室而异，但每两三个月的检测是必要的。选择适当的检测方法也是关键，PCR、生化分析、ELISA和免疫荧光等各有优劣。其中，PCR方法因其灵敏、特异、快速、廉价等特点而受到广泛推崇。

多种试剂盒为支原体检测提供了便利。例如，Sigma-Aldrich的LookOut Mycoplasma PCR Detection Kit能检测多达19种支原体。Biological Industries（BioInd）的EZ-PCR Mycoplasma Test Kit具有极高的灵敏度。Stratagene的MycoSensor QPCR Assay Kit则通过实时定量PCR检测支原体，整个过程只需2小时。R&D公司的MycoProbe Mycoplasma Detection Kit和Hoechst 33258染料检测法也是常用的检测方法。

最近，苏州先达基因公司研发的一种实时荧光恒温核酸检测技术（ERA）的支原体试剂盒引人注目，其检测范围涵盖130种支原体，灵敏度较高，操作简便。

预防支原体的最佳方法仍是良好的细胞培养技巧和正确的态度。熟悉细胞培养的我们时常需要提醒自己，不能因麻痹大意而让支原体有机可乘。只有持续警惕，才能确保实验的准确性。

支原体是细胞培养中的隐形杀手，需要我们时刻保持警惕，采取适当的预防措施和检测方法，确保实验的准确性和可靠性。