5大检查让尖锐湿疣现形

一、基因诊断：HPV检测的新途径

迄今为止，针对人乳头瘤病毒（HPV）的传统病毒培养及血清学技术检测存在困难。幸运的是，核酸杂交技术的实验诊断方法为我们提供了新的解决方案，特别是近年来发展的聚合酶链式反应（PCR）方法，以其特异、敏感、简便、快速的优点，为HPV检测开辟了新的途径。

（一）标本的采集及处理

1. 标本的采集和预处理：医生使用刮板或生理盐水浸润的棉棒从阴道和宫颈外口取得分泌物和细胞样本。这些样本经过特定的处理，如离心洗涤和DNA提取，以备后续分析。

2. 核酸提取：这一过程确保了病毒DNA的纯净度，为后续PCR反应的准确性奠定了基础。

（二）PCR扩增

1. 引物设计和合成：HPV基因组分为早期区（E）和晚期区（L）。在L1区中选择保守序列设计合成引物，如MY11和MY09，这些引物能识别HPV的多种类型。

2. PCR反应试剂和扩增方法：使用Taq DNA聚合酶和其他必要的反应试剂，进行PCR扩增。这一过程在特定的条件下进行，包括温度和时间的循环变化。

（三）扩增产物的检测和分析

1. 凝胶电泳：PCR产物通过凝胶电泳分析，结果显示在分子量约为450bp处有明显的DNA带。

2. 核酸杂交：对于结果不确定的样本，可以使用标记的公用混合探针和（或）型特异探针进行Southern吸印杂交、斑点杂交验证。这一过程确保了检测结果的准确性。

PCR方法在HPV检测中的优势在于其高敏感性。以凝胶电泳直接分析结果的GP-PCR方法，可以检出标本中仅200个拷贝的HPV DNA。如果使用核酸杂交检测PCR产物，敏感性将进一步提高，能检出仅10个拷贝的HPV DNA。这为医生提供了准确、快速的诊断工具，有助于早期发现和治疗与HPV相关的疾病。

PCR技术的出现为HPV检测带来了革命性的变化，使得医生能够更快速、更准确地诊断HPV感染。这对于预防和治疗与HPV相关的疾病，如宫颈癌等具有重要意义。PCR技术的卓越敏感性在医学检测领域展现出了巨大的优势，尤其是在检测生殖道脱落细胞中的病原体时，这一技术更是如鱼得水。避免了复杂的活检和组织研磨操作，大大简化了检测流程。PCR扩增产物经过凝胶电泳后，通过观察产生的DNA，即可迅速做出诊断。这种检测方式实验周期短、操作简便快速，为医学诊断带来了极大的便利。

接下来，我们深入免疫组织学检查。通过常用的过氧化物酶抗过氧化物酶方法（PAP），显示湿内的病毒蛋白，可以明确地证明疣损害中存在病毒抗原。当HPV蛋白阳性时，浅表上皮细胞内会出现淡红色的弱阳性反应，这为医生提供了直观的参考依据。

在组织化学检查中，我们取少量病损组织制成切片，用特异抗人类乳头瘤病毒的抗体进行染色。如果病损中存在病毒抗原，那么抗原抗体就会结合，在过氧化物酶抗过氧化物酶（PAP）方法中，细胞核会被染成红色。这种方法的特异性强且迅速，对诊断具有极高的帮助。

在病理检查方面，我们可以看到病损组织的角化不全、棘层高度肥厚以及乳头瘤样增生等现象。表皮突的增生程度可似假性上皮瘤样，刺细胞和基底细胞出现相当数量的核分裂，颇似癌变。但细胞的排列规则，且增生上皮和真皮之间的界限清晰。其中，粒层和刺层上部细胞显现明显的空泡形成，这种空泡细胞比正常细胞大，胞浆着色淡，中央部位则是大而圆、深嗜碱性的核。

醋酸白试验也是检测HPV的一种有效方法。用3-5%的醋酸外涂疣体，仅在短时间内（2-5分钟），病灶部位就会变白并稍微隆起。对于肛门病损可能需要更长时间（约15分钟）。本试验的原理在于蛋白质与酸凝固变白的结果。只有HPV感染细胞产生的角蛋白才会被醋酸脱色。虽然醋酸白试验的敏感性很高，但它并不是特异试验，偶尔会出现假阳性反应。在解读结果时需要谨慎。

这些检测方法共同为医学界提供了全面、准确的HPV检测手段。它们各自具有独特的优势，并在临床实践中发挥着不可替代的作用。对于患者而言，了解这些检测方法的原理和特性，有助于他们在面对健康问题时做出更为明智的决策。（实习编辑：陈占利）